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第一百零一期 花青素分離純化

2017年11月13日source:管理員
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花青素簡

? ? 花青素(Procyanidins)是由一定數(shù)量的兒茶素、表兒茶素縮合而成的聚合物,屬于酚類化合物中的類黃酮類,廣泛存在于各種植物的核、皮或籽中,如葡萄、松樹皮、杏殼、櫻桃花、山楂葉、云杉葉等。目前食品工業(yè)上使用的色素多為合成色素,幾乎都有不同程度的毒性,長期食用會(huì)危害人的健康,因此,天然色素逐漸引起了科研工作者的關(guān)注。花青素作為一種天然食用色素,不僅安全、無毒、資源豐富,還具有一定營養(yǎng)和藥理作用。研究表明,原花青素具有抗氧化、清除自由基、護(hù)肝解毒、降血壓、降血脂、消炎、抗癌、治療心血管疾病等功效,在食品、化妝、醫(yī)藥 方面有著巨大的應(yīng)用潛力。


花青素純化方法

? ??目前花青素的純化多采用柱層析法、液相萃取法、固相萃取法、膜分離技術(shù)等。其中柱層析是近年來最常用的花青素提純方法之一。

? ? 花青素的分離純化多選擇各種樹脂來去除提取物中糖、有機(jī)酸、礦物質(zhì)及其他水溶性雜質(zhì)。


大孔吸附樹脂法

? ? 早期分離花青素的填料多采用氧化鋁、甲醛酚醛樹脂、聚酰胺、聚乙烯吡咯烷酮等。如今應(yīng)用比較多的是XAD 7HP,XAD 4,HP20,AB-8。

? ? 王璐等確定AB-8吸附花青素的最佳條件是上樣濃度為7.5mg/ml,吸附時(shí)間為4h,吸附流速為3 BV/h,用25%~30%濃度乙醇進(jìn)行洗脫時(shí),得到純度>95%、低聚體含量為67.8%的原花青素樣品。


離子交換樹脂法

? ??如今使用較多的是Amberlite CG-50,DOWEX50W×8。


凝膠層析法

? ? 多采用Sephadex LH-20,Sephadex G-25,Toyopearl HW-40F等。


花青素的HPLC分析

? ? 1.選用的色譜條件為:色譜柱為Lichrospher 5 -C18柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈和10% 醋酸重蒸水溶液為流動(dòng)相,洗脫梯度為90%~80%,洗脫時(shí)間為30min時(shí),分析效果較好。在六個(gè)品種紫甘薯中,紫A4花青素含量最高為4.6058,川山紫花青素含量最低為2.0249,紫A1為3.1608、浙紫為4.5162、京薯6號(hào)為4.1663、鄂紫為2.5458。

? ? 2. 玫瑰花原花青素中單體及二聚體的HPLC分析方法,具體色譜條件為::分析柱:Eslipse XDB-C18,4.6mm×150mm5μm;流動(dòng)相:A:乙腈B:1.0%冰醋酸(pH=2.71);洗脫梯度:0-10min:5-10%A;10-100min:10-25%A;流速:1.0ml/min;檢測波長:280nm;柱溫:30℃;進(jìn)樣量:20μl。在此條件下,四種物質(zhì)(兒茶素、表兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯和原花青素B2)的分離度、方法的線性、精密度和加樣回收率均符合要求。定量分析結(jié)果顯示:原花青素B2的含量最高,達(dá)2.54%,表兒茶素含量為0.612%,表兒茶素沒食子酸酯含量為0.257%。


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