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H&E GST標簽蛋白純化親和介質
GST(谷胱甘肽轉移酶)能特異的與谷胱甘肽結合,表現為酶和底物的作用原理,利用這個原理,將GST做成標簽表達出融合蛋白,與谷胱甘肽配基的親和介質特異性結合,從而純化出目標蛋白。GST融合蛋白純化的特點有:純度高、純化條件溫和、保持蛋白活性、促進蛋白可溶性表達等。
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GST標簽蛋白純化親和介質列表

貨號

產品名稱

功能載量

/1ml介質

粒徑范圍μm

耐受壓力

MPa

最大流速cm/h

pH

穩(wěn)定性

應用

HZ1008-2

GST Focurose 4FF

15mg

(GST標簽蛋白)

45-165

0.3

450

3-12

純化GST標簽蛋白

備注

GST標簽蛋白純化親和介質除4FF基質,也可以定制其它基質,如4B6FF等。

GST標簽蛋白純化親和介質可以提供25ml,100ml300ml,500ml,1L,5L,10L等各種包裝規(guī)格。


GST標簽蛋白純化親和介質使用注意事項:

★ GST親和層析是利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過硫鍵共價親和結合,結合過程較慢,上樣時流速不宜過快,且緩沖液pH須控制在6.5到8.0之間;緩沖液添加1-10mM的DTT,可有效促進蛋白的溶解;添加100-300mM的NaCl可以減少蛋白之間及蛋白和核酸之間的結合。

★ 洗脫緩沖液應現配現用,也可在洗脫緩沖液中加入1-5 mM的DTT;洗脫緩沖液中加入1%-2%的Triton X-100可以顯著提高某些GST標簽蛋白的洗脫,降低非特異性吸附。

★ 在宿主細胞表達GST標簽蛋白的過程中,宿主細胞代謝的酶使GST-tag和目的蛋白分開,此時可嘗試換宿主細胞或者優(yōu)化序列。

★ 純化過程中要防止蛋白酶降解蛋白,必要時可以嘗試添加一些蛋白酶抑制劑。
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